उपन्यास लेबल मुक्त इमेजिंग तकनीक के भीतरी प्रकाश के भीतर टी कोशिकाओं-ScienceDaily


टी कोशिकाओं प्रतिरक्षा पर सैनिकों के frontlines के साथ लड़ाई में घुसपैठ की है कि रोगाणुओं की तलाश करने के लिए, बीमारी के कारण. एक नए अध्ययन में प्रकाशित प्रकृति बायोमेडिकल इंजीनियरिंग वर्णन करता है कि एक उपन्यास लेबल मुक्त इमेजिंग तकनीक है कि अलग कर सकते हैं सक्रिय टी कोशिकाओं के उन लोगों से बंद का कर्तव्य है ।

विधि मदद कर सकता है का आकलन टी सेल में भागीदारी immunotherapies कैंसर के उपचार के लिए या स्व-प्रतिरक्षित बीमारियों ।

“टी कोशिकाओं है एक चयापचय स्विच को नियंत्रित करता है कि उनकी गतिविधि,” कहते हैं, Melissa Skala, प्रधान अन्वेषक के Morgridge संस्थान के एसोसिएट प्रोफेसर, बायोमेडिकल इंजीनियरिंग पर UW-Madison. में एक स्वस्थ व्यक्ति के लिए, सबसे अधिक टी कोशिकाओं में कर रहे हैं, एक मौन राज्य-वे निष्क्रिय कर रहे हैं, लेकिन तैयार है और संकेत के लिए इंतजार कर में शामिल होने के लिए सक्रिय लड़ाई के खिलाफ एक हमलावर वायरस या बैक्टीरिया ।

“हम परीक्षण करना चाहता था, तो हमारे इमेजिंग तकनीक सकता है के बीच अंतर बताने मौन टी कोशिकाओं और सक्रिय टी कोशिकाओं कहते हैं,” एलेक्जेंड्रा वाल्श, पूर्व में एक सहायक वैज्ञानिक पर Morgridge संस्थान है, जो अब एक सहायक प्रोफेसर के बायोमेडिकल इंजीनियरिंग में टेक्सास एक एंड एम विश्वविद्यालय है.

सबसे तरीकों के लिए निस्र्पक टी कोशिकाओं एंटीबॉडी आधारित है, इस तरह के रूप में प्रवाह cytometry या immunohistochemistry. इन की आवश्यकता एंटीबॉडी के साथ धुंधला हो जाना या इसके विपरीत एजेंटों, एक प्रक्रिया है कि विनाशकारी करने के लिए कोशिकाओं.

वैकल्पिक रूप से, वाल्श और Skala की विधि का पता लगाता है autofluorescence से अणुओं है कि कक्ष के भीतर स्वाभाविक रूप से प्रकाश का उत्सर्जन जब imaged द्वारा एक माइक्रोस्कोप के साथ रखा एक अवरक्त लेजर. इस लेबल-मुक्त प्रक्रिया है, गैर-हानिकारक और नहीं व्यवहार में परिवर्तन सेल के. तकनीक अनुकूलित किया जा सकता है छवि के लिए कोशिकाओं में एक थाली या पकवान, ऊतकों के नमूनों, या यहां तक कि vivo में इमेजिंग के लिए एक पूरा जीव है ।

“यह सुपर उपन्यास,” Skala कहते हैं. “अधिकांश लोगों को नहीं कर रहे हैं, इन तकनीकों का उपयोग कर-तुम देख नहीं है एक बहुत कुछ के autofluorescence के अध्ययन में इम्यूनोलॉजी.”

को मान्य करने के लिए अपने दृष्टिकोण के साथ, शोधकर्ताओं ने अधिग्रहीत रक्त के नमूने से स्वस्थ दाताओं, पृथक टी कोशिकाओं, और मापा autofluorescence के नाद(P)H और सनक है, दो अणुओं कर रहे हैं कि सेलुलर चयापचय में शामिल.

“हम कुछ रखा की टी कोशिकाओं में उनके मौन राज्य, और हम फिर से जोड़ा गया करने के लिए एंटीबॉडी के एक समूह को सक्रिय करने के लिए उन्हें कहते हैं,” वाल्श.

छवियों के मौन कोशिकाओं बनाम सक्रिय कोशिकाओं का पता चला मतभेद में चयापचय समारोह है, सबसे विशेष रूप से एक परिवर्तन के माध्यम से नाद(P)एच autofluorescence में सक्रिय टी सेल की आबादी. उन्होंने यह भी कहा कि सक्रिय टी कोशिकाओं थे आकार में थोड़ा बड़ा की तुलना में मौन कोशिकाओं.

सक्रियण प्रोटोकॉल और इमेजिंग क्षमताओं के लिए उपयोगी हो जाएगा विनिर्माण कार टी कोशिकाओं में इस्तेमाल किया immunotherapies, कहते हैं Skala. ये फिर से इंजीनियर टी कोशिकाओं अक्सर सह-सुसंस्कृत अन्य कोशिकाओं के साथ, की तरह, कैंसर की कोशिकाओं का परीक्षण करने के लिए अपने जेट.

हालांकि, का उपयोग करते हुए अतिरिक्त कठोर अभिकर्मकों या एंटीबॉडी लेबल करने के लिए आगे की विशेषताएँ टी सेल एक अड़चन है के लिए कार टी सेल निर्माताओं. के autofluorescent दृष्टिकोण प्रदान करता है एक आकर्षक तरीके से प्रदर्शन करने के लिए उन प्रयोगों इमेजिंग द्वारा एक ही कोशिकाओं भर में एकाधिक timepoints में एक तरीका है कि गैर हानिकारक.

“हम पता चला है कि आप को हल कर सकते हैं अस्थायी परिवर्तन के साथ हमारे इमेजिंग तकनीक कहते हैं,” वाल्श. “हम देखने के लिए सक्षम थे में परिवर्तन इमेजिंग के समापन के बाद मिनट के भीतर जोड़ने के सक्रिय एंटीबॉडी.”

वाल्श कहते हैं कि यह देखने के लिए मुश्किल होगा इन गतिशील परिवर्तन का उपयोग कर प्रवाह cytometry, के बाद से आवश्यक समय के लिए धुंधला और ऊष्मायन यह मुश्किल बनाने के लिए पर कब्जा करने के लिए एकाधिक timepoints.

के Skala लैब की योजना जारी रखने के लिए इस लाइन की जांच करने के लिए बेहतर समझ कैसे एक कैंसर रोगी की टी कोशिकाओं में हो सकता है प्रतिक्रिया के रूप में ट्यूमर बढ़ता है या के रूप में वे कर रहे हैं के साथ इलाज किया immunotherapies.

“इन प्रौद्योगिकियों सकता है हमें बताओ के बारे में कुछ ट्यूमर या के बारे में टी सेल विनिर्माण है कि हम नहीं पता था,” कहते हैं Skala, “क्योंकि हम पहले से नहीं था के तरीकों पर नजर रखने के लिए टी सेल व्यवहार समय के साथ.

जबकि इस नई तकनीक पर कई लाभ प्रदान करता पारंपरिक तरीकों, वहाँ रहे हैं अभी भी सीमाएं हैं । एक के लिए, autofluorescence इमेजिंग के लिए नहीं है, बहुत ही संवेदनशील है ।

“हम नहीं कर रहे हैं पर निर्भर वास्तव में विशिष्ट लेबल, हम पर भरोसा कर रहे हैं चयापचय की कोशिकाओं,” Skala कहते हैं. “यह केवल आप अभी तक मिल में फर्क सेल प्रकार के।”

इसके अतिरिक्त, तकनीक की आवश्यकता है अनुभवी लोगों को प्रदर्शन करने के लिए सूक्ष्म इमेजिंग और डेटा का विश्लेषण, वाल्श कहते हैं.

के Skala लैब पर काम कर रहा है विकसित एक प्रोटोटाइप लेने के लिए इमेजिंग क्षमता के अपने बड़े पैमाने पर माइक्रोस्कोप और यह अनुवाद में, एक “बॉक्स-आकार” प्रणाली.

“आप नहीं होगा किया जा करने के लिए एक विशेष ऑप्टिकल इंजीनियर का उपयोग करने के लिए यह,” Skala कहते हैं. “उस दिशा में हम प्रयास कर रहे हैं जाने के लिए. हम कोशिश कर रहे हैं करने के लिए इसे और अधिक सुलभ बनाने.”



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